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如何全面控制桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的產(chǎn)品質(zhì)量？

在生物制藥領(lǐng)域，桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)以其高效表達(dá)復(fù)雜蛋白的能力被廣泛應(yīng)用，尤其適用于疫苗、病毒樣顆粒和某些重組蛋白的生產(chǎn)。然而，該系統(tǒng)的產(chǎn)品質(zhì)量控制尤為復(fù)雜，主要涉及翻譯后修飾的異質(zhì)性、宿主來源雜質(zhì)以及病毒安全性等多個(gè)維度。產(chǎn)品質(zhì)量屬性的有效控制不僅直接影響藥物的安全性與有效性，也是監(jiān)管申報(bào)和技術(shù)審評(píng)的核心關(guān)注點(diǎn)。本文將從糖基化修飾差異的精準(zhǔn)檢測(cè)、宿主細(xì)胞蛋白殘留的多策略控制，以及病毒滅活與去除工藝的系統(tǒng)驗(yàn)證三個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，深入解析其質(zhì)量控制策略，以期為工藝開發(fā)與質(zhì)量研究...

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成纖維細(xì)胞生長因子18（FGF18）：從發(fā)育調(diào)控到治療新星的多面角色

一、什么是成纖維細(xì)胞生長因子18？它在FGF家族中處于什么地位？成纖維細(xì)胞生長因子18（FGF18）是成纖維細(xì)胞生長因子（FGF）家族的成員之一，該家族由22個(gè)結(jié)構(gòu)相關(guān)的信號(hào)蛋白組成，在哺乳動(dòng)物中廣泛參與調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、遷移和存活等一系列關(guān)鍵生物學(xué)過程。FGF18于1998年被發(fā)現(xiàn)并克隆，其基因位于人類染色體5q35.1。在系統(tǒng)進(jìn)化上，F(xiàn)GF18與FGF8和FGF17共同歸屬于FGF8亞家族（也稱為旁分泌FGF亞家族），它們享有較高的氨基酸序列同源性，但在體內(nèi)卻執(zhí)行著獨(dú)特...

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分子互作研究難題何解？SPR技術(shù)能否成為你的利器？

在當(dāng)今科研與藥物研發(fā)并重的時(shí)代，探索分子間相互作用已成為眾多研究者必須面對(duì)的核心課題。無論是蛋白-蛋白、蛋白-DNA還是蛋白-RNA互作，可靠的研究手段對(duì)推進(jìn)科學(xué)發(fā)現(xiàn)與藥物開發(fā)至關(guān)重要。然而，傳統(tǒng)方法如酵母雙雜交假陽性率高、Co-IP難以證明直接作用、FRET成本高昂，均存在明顯局限。是否存在一種高效、精準(zhǔn)且可定量分析分子互作的技術(shù)？隨著《中國藥典2020版》將表面等離子共振技術(shù)（SPR）正式納入，這一方法正逐漸走入科研與工業(yè)應(yīng)用的視野。1.為何SPR技術(shù)在分子互作研究中脫穎...

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CRL3泛素連接酶如何動(dòng)態(tài)調(diào)控底物降解？

蛋白質(zhì)的泛素化修飾在真核細(xì)胞的生命進(jìn)程中扮演核心角色。Cullin-RINGE3泛素連接酶（CRLs）作為泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（UPS）中的關(guān)鍵組成部分，是哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)最大的E3酶家族，負(fù)責(zé)特異性識(shí)別、泛素化并降解底物蛋白，從而精密調(diào)控多種生理過程。CRL3作為其中一類重要亞型，特異性地利用BTB結(jié)構(gòu)域蛋白作為底物適配子。人類基因組編碼超過180種BTB蛋白，CRL3復(fù)合物廣泛參與糖脂代謝、癌癥發(fā)生、細(xì)胞周期及發(fā)育等重要生物學(xué)事件。然而，由于CRL3結(jié)構(gòu)復(fù)雜，其分子架構(gòu)與催化...

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如何利用非天然氨基酸開發(fā)高選擇性去泛素化酶探針？

1.如何開發(fā)高選擇性去泛素化酶（DUB）化學(xué)探針？去泛素化酶（DUBs）在細(xì)胞內(nèi)負(fù)責(zé)移除蛋白質(zhì)上的泛素修飾，在病毒感染、神經(jīng)退行性疾病及癌癥等多種病理過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，是具潛力的治療靶點(diǎn)。人類基因組編碼約100種DUB，然而目前缺乏能夠特異性識(shí)別并表征其活性的化學(xué)工具，限制了在生理與病理?xiàng)l件下對(duì)其功能的研究。盡管商品化的廣譜熒光底物（如C端泛素序列或熒光標(biāo)記泛素分子）已廣泛應(yīng)用于DUB的生化分析，但仍亟需開發(fā)能夠針對(duì)單個(gè)DUB的高選擇性探針。2.如何利用非天然氨基酸篩選DU...

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