技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2025-819
黏液屏障的"建筑大師":MUC2的分泌與分子架構(gòu)腸道黏膜表面,一層由黏蛋白2(MUC2)構(gòu)建的黏液屏障正進(jìn)行著一場持續(xù)的防御戰(zhàn)。作為腸道黏液的主要成分,MUC2由杯狀細(xì)胞像精密工廠般合成:核糖體翻譯的單體在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通過二硫鍵形成二聚體,經(jīng)高爾基體O型糖基化修飾后,以分泌顆粒形式運(yùn)送到細(xì)胞表面,最終在腸腔展開成六邊形網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其體積可膨脹千倍以上,形成隔絕病原體的"黏液城墻"。在杯狀細(xì)胞中裝配MUC2MUC2結(jié)構(gòu):分子骨架的精妙設(shè)計(jì)富含脯氨酸、蘇氨酸、絲氨酸的PTS區(qū)域構(gòu)成"彈性...
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2025-818
GST標(biāo)簽蛋白(谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶標(biāo)簽蛋白)是一種廣泛用于分子生物學(xué)中的融合蛋白標(biāo)簽。GST是一種催化藥物代謝的酶,能夠與谷胱甘肽(GSH)結(jié)合。通過在目標(biāo)蛋白質(zhì)上附加GST標(biāo)簽,可以方便地純化目標(biāo)蛋白,并進(jìn)一步分析其功能和性質(zhì)。GST標(biāo)簽的優(yōu)勢:1.提高蛋白表達(dá):有助于蛋白質(zhì)的表達(dá),因?yàn)镚ST本身能穩(wěn)定目標(biāo)蛋白,減少其在細(xì)胞內(nèi)的降解。2.高親和力結(jié)合:GST與谷胱甘肽的結(jié)合具有非常強(qiáng)的親和力,這使得GST標(biāo)簽在目標(biāo)蛋白純化中非常有效。GST標(biāo)簽在蛋白純化中的應(yīng)用:1.融合表...
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2025-818
一、腦內(nèi)的"警報(bào)蛋白":S100β的雙重身份揭秘在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的精密網(wǎng)絡(luò)中,S100β蛋白如同一位矛盾的"雙面間諜"——它既是星形膠質(zhì)細(xì)胞釋放的神經(jīng)營養(yǎng)因子,也是腦損傷時(shí)拉響警報(bào)的炎癥介質(zhì)。這種21KDa的鈣鋅結(jié)合蛋白,因在腦損傷后隨血腦屏障破壞而大量釋放入血,被稱為腦部的"C反應(yīng)蛋白"。正常生理狀態(tài)下,它在血液和腦脊液中濃度極低,而當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞遭受創(chuàng)傷或病變時(shí),其水平會(huì)呈指數(shù)級(jí)飆升,成為監(jiān)測腦損傷的特異性生物標(biāo)志物。S100β結(jié)構(gòu)二、分子架構(gòu)與信號(hào)網(wǎng)絡(luò):S100β的"鈣敏感開...
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2025-818
你的磷酸化抗體,可能正在毀掉實(shí)驗(yàn)?蛋白磷酸化作為信號(hào)通路研究的"黃金指標(biāo)",其檢測堪稱科研人必修的"顯微鏡級(jí)"技術(shù)活。Westernblot雖為常規(guī)手段,但磷酸化檢測的特殊性,讓每個(gè)環(huán)節(jié)都藏著"翻車風(fēng)險(xiǎn)"。今天就來拆解這套"高難度動(dòng)作"的正確打開方式——一、解碼樣品:先摸清磷酸化蛋白的"脾氣"磷酸化蛋白往往是細(xì)胞里的"特殊玩家",想讓它們"現(xiàn)身"得用點(diǎn)巧勁:刺激誘導(dǎo)有講究:物理/化學(xué)刺激是激活磷酸化的常用手段,但時(shí)間和強(qiáng)度堪稱"玄學(xué)"——查文獻(xiàn)+預(yù)實(shí)驗(yàn)是捷徑(比如某細(xì)胞因子可...
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2025-815
基因的"分子印章":DNA甲基化的原理與定義在基因組的"書寫系統(tǒng)"中,DNA甲基化如同一種隱形的"分子印章"——在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT)的催化下,S-腺苷甲硫氨酸(SAM)提供甲基基團(tuán),將胞嘧啶(C)修飾為5-甲基胞嘧啶(5mC),主要發(fā)生在哺乳動(dòng)物的CpG二核苷酸位點(diǎn)(圖1)。這種修飾不改變DNA序列,卻能像"基因開關(guān)"般調(diào)控染色質(zhì)構(gòu)象與基因表達(dá),堪稱表觀遺傳學(xué)的"基礎(chǔ)語法"。其中哺乳動(dòng)物細(xì)胞中甲基化主要發(fā)生在CG雙核苷酸的胞嘧啶上(GoldbergAD,2007),...
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