GST標(biāo)簽蛋白（谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶標(biāo)簽蛋白）是一種廣泛用于分子生物學(xué)中的融合蛋白標(biāo)簽。GST是一種催化藥物代謝的酶，能夠與谷胱甘肽（GSH）結(jié)合。通過(guò)在目標(biāo)蛋白質(zhì)上附加GST標(biāo)簽，可以方便地純化目標(biāo)蛋白，并進(jìn)一步分析其功能和性質(zhì)。
GST標(biāo)簽的優(yōu)勢(shì)：
1.提高蛋白表達(dá)：有助于蛋白質(zhì)的表達(dá)，因?yàn)镚ST本身能穩(wěn)定目標(biāo)蛋白，減少其在細(xì)胞內(nèi)的降解。
2.高親和力結(jié)合：GST與谷胱甘肽的結(jié)合具有非常強(qiáng)的親和力，這使得GST標(biāo)簽在目標(biāo)蛋白純化中非常有效。
GST標(biāo)簽在蛋白純化中的應(yīng)用：
1.融合表達(dá)：通過(guò)基因工程技術(shù)，將目標(biāo)蛋白的基因與GST基因融合，在表達(dá)系統(tǒng)（如大腸桿菌）中表達(dá)。
2.蛋白質(zhì)提?。簭谋磉_(dá)系統(tǒng)中提取細(xì)胞裂解液。
3.親和層析：將裂解液通過(guò)包含谷胱甘肽的親和柱，GST標(biāo)簽會(huì)與谷胱甘肽結(jié)合，從而使目標(biāo)蛋白被富集。
4.洗脫：通過(guò)使用過(guò)量的游離谷胱甘肽或改變鹽濃度洗脫目標(biāo)蛋白。
1.蛋白互作研究：通過(guò)將其與其他可能的互作蛋白一起表達(dá)，可以通過(guò)GSTpull-down實(shí)驗(yàn)研究蛋白間的相互作用。
2.抗體生成：GST融合蛋白也可用于抗體的制備，因?yàn)镚ST本身是一個(gè)高免疫原性的蛋白，能夠激活免疫系統(tǒng)。
3.蛋白定位和功能分析：研究人員可以追蹤目標(biāo)蛋白在細(xì)胞內(nèi)的位置和動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)而分析其功能。
GST標(biāo)簽蛋白的改進(jìn)與變種：
雖然GST標(biāo)簽是一種非常有用的工具，但也存在一些限制。例如，GST標(biāo)簽可能會(huì)影響目標(biāo)蛋白的折疊、活性或穩(wěn)定性。因此，研究人員開發(fā)了許多不同的變種，以提高效率或減小對(duì)目標(biāo)蛋白的干擾。
1.GST-fusion蛋白變種：包括雙標(biāo)簽系統(tǒng)（如GST與His標(biāo)簽的組合），這種系統(tǒng)可以進(jìn)一步提高純化效率，或改善對(duì)某些蛋白的親和性。
2.清洗和去除標(biāo)簽：通過(guò)使用特定的酶（如HRV3C蛋白酶、PreScission蛋白酶）切割GST標(biāo)簽，使得研究人員能夠去除GST標(biāo)簽后得到純凈的目標(biāo)蛋白。
更新時(shí)間：2025-08-18
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