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蛋白
酶制劑
UA070083Pfu DNA聚合酶
產(chǎn)品型號:UA070083
更新時間:2025-08-11
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:73
15855403091
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱
Pfu DNA聚合酶(UA070083)
貨號
UA070083
產(chǎn)品簡述
本品是從超嗜熱古菌Pyrococcus furiosus中克隆表達(dá)的高保真DNA聚合酶,具有3'→5'外切酶校正活性,適用于高精度PCR擴(kuò)增和分子克隆實驗。
產(chǎn)品特性
? 保真度:比Taq DNA聚合酶高10倍
? 擴(kuò)增速度:1-2 kb/min
? 熱穩(wěn)定性:97℃半衰期>120分鐘
? 緩沖系統(tǒng):含優(yōu)化Mg2?濃度的10×反應(yīng)緩沖液
? 濃度:2.5 U/μL
質(zhì)量控制
• 純度:SDS-PAGE檢測單一條帶
• 活性:標(biāo)準(zhǔn)條件下擴(kuò)增5kb片段能力驗證
• DNase/RNase檢測:陰性
• 內(nèi)毒素:<0.1 EU/μL
應(yīng)用領(lǐng)域
◆ 高保真PCR擴(kuò)增
◆ 定點突變實驗
◆ 基因克隆與亞克隆
◆ 長片段DNA擴(kuò)增(可達(dá)15kb)
◆ NGS文庫制備
使用說明
標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系(50μL):
1× Pfu緩沖液
200μM dNTPs
0.5μM引物
1-2.5U酶
推薦循環(huán)參數(shù):
初始變性:95℃ 2min
循環(huán):95℃ 30s → 55-65℃ 30s → 72℃ 1kb/min
終延伸:72℃ 5min
保存條件
• -20℃保存,避免反復(fù)凍融
• 10×緩沖液室溫保存
• 有效期:2年
注意事項
? 需配合Proofreading級dNTPs使用
? 擴(kuò)增長片段時建議添加DMSO
? 不能用于熱啟動PCR
? 產(chǎn)物為平末端,需特殊處理用于連接
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