產(chǎn)品名稱： M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶
產(chǎn)品貨號： UA070067

產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品是源自莫洛尼鼠白血病病毒（M-MLV）的重組逆轉(zhuǎn)錄酶，已通過基因工程去除了天然的RNase H活性。該酶具有強(qiáng)大的RNA依賴的DNA聚合酶活性，能夠高效地將RNA模板逆轉(zhuǎn)錄為第一鏈cDNA，專為高靈敏度、高得率的RT-PCR和兩步法qRT-PCR實(shí)驗(yàn)而優(yōu)化。

產(chǎn)品特性

• 酶來源： 重組莫洛尼鼠白血病病毒（M-MLV）

• 活性： 強(qiáng)效的RNA依賴的DNA聚合酶活性

• RNase H活性： 無

• 反應(yīng)最適溫度： 37-42°C

• 儲存緩沖液： 含50%甘油的緩沖體系

產(chǎn)品優(yōu)勢

• 高合成效率： 無RNase H活性，可有效延伸更長的cDNA鏈，尤其適用于長片段cDNA的合成。

• 熱穩(wěn)定性增強(qiáng)： 反應(yīng)溫度可提高至42°C乃至50°C，有助于打開RNA的復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)，提高復(fù)雜模板的逆轉(zhuǎn)錄效率。

• 靈敏度高： 能夠?qū)Φ拓S度RNA模板或極少量RNA樣品（低至pg級）進(jìn)行高效逆轉(zhuǎn)錄。

• 兼容性強(qiáng)： 與多種下游應(yīng)用兼容，包括常規(guī)PCR、熒光定量PCR、cDNA文庫構(gòu)建等。

應(yīng)用

• 第一鏈cDNA合成

• RT-PCR

• 兩步法實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）

• cDNA文庫構(gòu)建

• 基因表達(dá)分析

使用說明

1. 反應(yīng)體系設(shè)置： 在無菌無核酸酶的離心管中，依次加入模板RNA、引物（Oligo dT、隨機(jī)引物或基因特異性引物）、dNTPs、反應(yīng)緩沖液和M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶，輕柔混勻。

2. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)程序：

• 引物退火：在25°C孵育5分鐘。

• 逆轉(zhuǎn)錄延伸：推薦在42°C孵育30-60分鐘（對于復(fù)雜模板，可提高至50°C）。

• 酶失活：在85°C加熱5分鐘以終止反應(yīng)。

3. 下游應(yīng)用： 所得cDNA產(chǎn)物可直接用于PCR擴(kuò)增，或稀釋后用于qPCR反應(yīng)。建議將未使用的cDNA保存于-20°C。

保存條件
本品應(yīng)保存于-20°C，避免反復(fù)凍融。在推薦的儲存條件下，可保持活性穩(wěn)定至少12個(gè)月。

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