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噬菌體(Bacteriophage,簡稱“噬菌體”或“噬菌病毒”)是一類專門感染細菌的病毒。它們是由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)(DNA或RNA)組成。噬菌體在自然界中廣泛存在,能夠在細菌的表面附著并將其遺傳物質(zhì)注入細菌細胞內(nèi),從而利用細菌的生物機制進行復(fù)制。常見的噬菌體種類M13噬菌體的結(jié)構(gòu)示意圖噬菌展示技術(shù)介紹歷史背景該技術(shù)由GeorgeSmith于1985年,因其在定向分子進化中的貢獻,Smith與GregoryWinter共同獲得2018年諾貝爾化學(xué)獎。M13因其溫和特...
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蛋白激酶C(PKC)信號通路是細胞內(nèi)重要的信號傳導(dǎo)途徑,涉及多種細胞過程的調(diào)控,包括細胞增殖、分化、凋亡、轉(zhuǎn)錄、致癌性、細胞毒效應(yīng)以及細胞遷移等。根據(jù)其結(jié)構(gòu)和激活機制的不同,可以分為以下三類:經(jīng)典型PKC(cPKC):包括α、βI、βII和γ等4種亞型。這些PKC亞型具有典型的結(jié)構(gòu),可以被甘油二酯(DAG)、Ca2+和磷脂酰絲氨酸(PS)或佛波酯(PMA)激活新型PKC(nPKC):包括δ、ε、η和θ等4種亞型。這些PKC亞型的激活只需要DAG或PMA,不依賴于Ca2+非經(jīng)典...
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前言蛋白標簽(ProteinTag)是一種與目的蛋白融合表達的多肽或蛋白,用于輔助目的蛋白的表達、檢測、示蹤和純化等。常見的標簽蛋白根據(jù)用途分為多肽標簽(如Flagtag、Histag)、親和標簽(如MBP、GST)和熒光標簽(如mCherry)。標簽抗體(TagAntibody)是一類特異性抗體,能夠識別并結(jié)合到融合蛋白上的特定標簽序列,用于檢測和純化目標蛋白,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)表達、定位、相互作用和功能研究等領(lǐng)域。標簽抗體與瓊脂糖珠結(jié)合后,可以有效地從細胞裂解液中拉下與之結(jié)...
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HIS標簽蛋白是一種常用于分子生物學(xué)中的融合標簽,用于對重組蛋白的純化、鑒定、分析等操作。HIS標簽通常是由6個連續(xù)的組氨酸殘基(His)組成的短肽序列,通常位于目標蛋白的N端或C端。通過與鎳(Ni)離子結(jié)合,HIS標簽提供了一種高效、簡便的純化方法,廣泛應(yīng)用于蛋白表達、純化和檢測等方面。HIS標簽蛋白的優(yōu)勢:1.簡單易行HIS標簽的應(yīng)用非常簡便,操作步驟明確且不需要特殊的工具或設(shè)備。通過簡單的金屬親和層析技術(shù),就能快速、高效地純化蛋白,適用于高通量篩選、蛋白表達系統(tǒng)的優(yōu)化等...
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蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Post-translationalmodification,PTM)對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能、穩(wěn)定性和定位等有重要影響。修飾一直以來都是國自然的熱點研究領(lǐng)域,從2021年起國家自然科學(xué)基金委員會發(fā)布《生物大分子動態(tài)修飾與化學(xué)干預(yù)重大研究計劃》,其中提及的生物大分子動態(tài)修飾檢測、泛素化修飾合成和給予蛋白質(zhì)修飾的抗腫瘤新靶標鑒定等相關(guān)項目都是重點關(guān)注領(lǐng)域。在2023國自然中,乳酸化、甲基化、泛素化、乙酰化等修飾因其在調(diào)控蛋白質(zhì)功能、穩(wěn)定性、亞細胞定位以及蛋白質(zhì)間相...
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