在疾病治療研究中，藥物需通過口服、注射等途徑遞送至體內(nèi)以發(fā)揮療效。在基礎(chǔ)科研中，使用慢病毒、腺相關(guān)病毒（AAV）等工具病毒通過注射方式導(dǎo)入動(dòng)物模型，是研究基因功能、代謝途徑及疾病機(jī)制的重要手段。選擇合適的體內(nèi)注射策略對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性與重復(fù)性至關(guān)重要。下文將系統(tǒng)介紹常見注射途徑的操作步驟與注意事項(xiàng)，為實(shí)驗(yàn)人員提供參考。

一、如何通過尾靜脈注射實(shí)現(xiàn)高效系統(tǒng)遞送？

尾靜脈注射是小鼠和大鼠系統(tǒng)中廣泛應(yīng)用的給藥方式，適用于病毒載體、藥物或細(xì)胞的高效輸送。

操作步驟：

1.輕柔提取小鼠，置于鼠籠蓋或操作者手背進(jìn)行安撫；

2.將動(dòng)物裝入固定器，露出尾部，用酒精棉球擦拭或適度加熱（如溫水或燈照）以擴(kuò)張血管；

3.拉直尾巴，識別尾靜脈位置；

4.于尾尖1/3處進(jìn)針，若阻力小且進(jìn)針順暢，提示針頭位于血管內(nèi)；

5.回抽注射器，若有回血?jiǎng)t可緩慢注射；

6.注射完畢后用棉球輕壓注射點(diǎn)約1分鐘以防出血；

7.將動(dòng)物放回籠中觀察。

補(bǔ)充說明：

病毒注射量需嚴(yán)格按體重及實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整。例如6周齡大鼠（約150g）可注射AAV9，典型劑量為3×1013 – 1×101? v.g./kg，體積不超過200µl。

二、顳靜脈注射適用于新生小鼠嗎？

顳靜脈或面靜脈注射常用于新生小鼠，因其血管較為明顯且操作可視性好。

操作步驟：

1.將幼鼠置于濕冰上30–60秒實(shí)現(xiàn)輕度麻醉，注意避免過長時(shí)間導(dǎo)致并發(fā)癥；

2.準(zhǔn)備注射器，吸入約30µl試劑（如伊文思藍(lán)）；

3.在顯微鏡下固定小鼠頭部，識別顳靜脈；

4.斜面向上進(jìn)針，可見血液回流顯示成功進(jìn)入血管；

5.緩慢推注，觀察血管是否發(fā)生漂白現(xiàn)象；

6.注射后留置針頭10–15秒，防止反流。

三、腹腔注射應(yīng)注意哪些操作細(xì)節(jié)？

腹腔注射（IP）操作簡便、適用性廣，適合大體積藥液注射，但需注意避免損傷內(nèi)臟。

操作步驟：

1.固定動(dòng)物，使其腹部朝上，頭部略低；

2.選擇下腹部距離腹白線約0.5 cm處作為進(jìn)針點(diǎn)；

3.以約30°角刺入腹腔，進(jìn)針不宜超過1 cm；

4.回抽無血無體液后緩慢注射；

5.拔針時(shí)輕微旋轉(zhuǎn)以防漏液；

6.放回動(dòng)物并持續(xù)觀察其狀態(tài)。

四、如何完成精準(zhǔn)的視網(wǎng)膜下注射？

該技術(shù)適用于眼科疾病模型及基因治療研究，操作精度要求高，常需顯微手術(shù)設(shè)備輔助。

操作步驟：

1.麻醉動(dòng)物并瞳孔擴(kuò)張；

2.準(zhǔn)備微量注射器（病毒液量1.5–2µl）；

3.開瞼并放置蓋玻片以清晰顯示視網(wǎng)膜；

4.于角膜緣后方穿孔，插入33 G鈍頭針；

5.緩慢注入病毒液，觀察視網(wǎng)膜下水泡形成；

6.輕柔退針并閉合眼瞼。

五、腦立體定位注射如何實(shí)現(xiàn)核團(tuán)特異性遞送？

該法用于精準(zhǔn)腦區(qū)注射，需依賴腦立體定位儀和腦圖譜坐標(biāo)。

操作步驟：

1.麻醉動(dòng)物并頭部固定于定位儀；

2.剃毛消毒后切開頭皮，暴露顱骨及前囟（Bregma）、后囟（Lambda）；

3.根據(jù)圖譜確定目標(biāo)核團(tuán)坐標(biāo)，鉆孔開窗；

4.使用微量注射系統(tǒng)緩慢注入病毒；

5.注畢留針數(shù)分鐘，防止反流；

 6.縫合皮膚，復(fù)蘇動(dòng)物并后續(xù)觀察。

六、其他常見注射方式有哪些？

還包括肌肉注射（IM）、皮下注射（SC）、皮內(nèi)注射（ID）、灌胃（IG）及鞘內(nèi)注射（IT）、脊神經(jīng)注射等，各適用于不同研究目的：

• 肌肉注射：常用于疫苗或基因治療，多選擇股四頭肌或大腿外側(cè)肌群；

• 皮下注射：適用于緩釋制劑，注射時(shí)拉起皮膚形成“帳篷"結(jié)構(gòu)；

• 皮內(nèi)注射：用于免疫激發(fā)實(shí)驗(yàn)，注射后可見明顯皮內(nèi)水皰；

• 灌胃：用于口服給藥，需使用帶球狀頭部的灌胃針避免誤入氣道；

• 鞘內(nèi)注射：適用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物遞送，需準(zhǔn)確識別椎間隙；

• 脊神經(jīng)注射：用于周圍神經(jīng)疾病模型，操作復(fù)雜度高，常需顯微分離技術(shù)。

結(jié)語

選擇合適的體內(nèi)注射方式需綜合考慮研究目的、動(dòng)物模型、試劑特性及操作可行性。嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)范、注重動(dòng)物福利及倫理要求，是保證實(shí)驗(yàn)科學(xué)性和結(jié)果可靠性的基礎(chǔ)。建議初次操作者在經(jīng)驗(yàn)豐富人員指導(dǎo)下進(jìn)行，并積極利用視頻教程與實(shí)驗(yàn)指南等資源提升操作一致性。

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